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수요일, 4월 23, 2025

Metagenomic: 보이지 않는 세계를 탐구하다

가지고와보니 미생물군집에 대한 연구 내용에 대한 전반적으로 훑어보는 내용인듯하네요 시간 될 떄 전문을 읽어보면 좋지 않을까 합니다. 제목은 Analysis of metagenomic data 입니다.

DOI: 10.1038/s43586-024-00376-6


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Metagenomics는 미생물 군집의 유전체 및 기능적 다양성을 이해하는 데 혁신적인 방법을 제공하며, 다양한 생태계에서의 연구뿐만 아니라 인간 건강, 농업, 환경 모니터링에도 응용되고 있습니다.

1. **Metagenomics의 정의와 목적**

   - Metagenomics는 미생물 군집의 유전체 및 기능적 잠재력을 분석하는 학문입니다.

   - 이 연구는 자연 서식지에서의 미생물 복잡성과 기능을 이해하는 데 기여합니다.

2. **연구 방법론**

   - Metagenomics 연구는 샘플 수집, DNA 추출, 염기서열 분석 등의 과정을 포함합니다.

   - Next-generation sequencing은 metagenomics 연구의 스케일과 정확도를 크게 향상시켰습니다.

3. **응용 분야**

   - Metagenomics는 인간 건강, 식품 안전, 농업, 생명공학 등 다양한 분야에 적용됩니다.

   - 이를 통해 새로운 미생물 발견과 미생물과 환경 간의 상호작용에 대한 이해를 증진시킵니다.

4. **도전 과제와 개선 방안**

   - 표준화된 프로토콜의 부재로 인해 재현성이 제한되며, 샘플 처리 방법이 연구 결과에 큰 영향을 미칩니다.

   - 실험 프로토콜과 계산 방법의 개선을 통해 이러한 문제를 해결하려는 노력이 진행 중입니다.

5. **미래 전망**

   - Metagenomics는 더 강력한 계산 프레임워크와 다학제 간 협력을 통한 발전이 기대됩니다.

   - 이를 통해 미생물 생태학의 복잡성과 인간 건강 및 환경 지속 가능성에 대한 더 깊은 통찰을 얻을 수 있을 것입니다.



chatGPT

metagenomics 이해 : 미생물 연구에 대한 혁신적인 접근

배경

Metagenomics는 과학자들이 다양한 환경에 존재하는 미생물 수명의 다양성을 탐구 할 수있는 강력한 도구입니다. "메타고 유전학"이라는 용어는 토양, 물 또는 인간 미생물 군과 같은 환경 샘플에서 직접 회수 된 유전 물질의 연구를 말합니다. 실험실에서 미생물을 배양하는 데 중점을 둔 전통적인 방법과 달리 Metagenomics는 연구원이 완전한 미생물 공동체를 분석하여 구성과 기능에 대한 풍부한 정보를 드러냅니다.

수년에 걸쳐 Metagenomics는 특히 인간 건강, 농업 및 환경 모니터링과 같은 분야에서 미생물 생태계에 대한 우리의 이해에 혁명을 일으켰습니다. 이 분야의 진화는 차세대 시퀀싱 (NGS)의 발전과 밀접한 관련이 있었으며, 이는 시퀀싱 비용을 크게 줄여서 대규모 프로젝트에 더 쉽게 접근 할 수있게 해줍니다.

** 메타 게놈 연구의 목적 **

메타 게놈의 주요 목표는 자연 환경에서 미생물 공동체의 다양성과 기능을 이해하는 것입니다. 미생물은 생태계에서 중요한 역할을하여 영양소 순환, 식물 성장 및 심지어 인간 건강과 같은 과정에 영향을 미치기 때문에 중요합니다. 환경 샘플로부터 직접 미생물의 유전자 물질을 분석함으로써, 메타고 유전학은 배양하기 어려운 종을 발견하고 다양한 생물학적 과정에 필수적인 이전에 알려지지 않은 기능을 식별 할 수있다.

예를 들어, 인간 건강에서 Metagenomics는 연구자들이 우리 신체에 사는 미생물의 수집 인 미생물 군집이 당뇨병, 암 또는 정신 건강 장애와 같은 질병에 어떻게 영향을 미치는지 조사하는 데 도움이됩니다. 마찬가지로 농업에서는 토양 미생물이 식물의 성장과 작물 수율에 어떻게 기여하는지 이해하는 데 도움이됩니다.

** Metagenomics에 사용되는 방법 **

Metagenomic 연구는 물, 토양 또는 인간 대변과 같은 환경 샘플의 수집으로 시작합니다. 이들 샘플로부터 DNA를 추출한 다음, 유전자 물질은 NGS 기술을 사용하여 서열화된다. 이 접근법은 존재하는 미생물을 식별하고 그들의 기능을 예측하기 위해 분석 된 수백만 개의 DNA 단편을 생성합니다.

이 데이터를 해석하기 위해 연구원들은 생물 정보학 도구를 사용하여 시퀀스를 처리하고 분석합니다. 분석에는 분류 학적 분류 (존재하는 종을 식별), 기능 프로파일 링 (이 종의 역할을 이해) 및 게놈 조립 (개별적으로 검출하기에는 너무 드문 미생물의 게놈 재구성)이 포함될 수 있습니다.

그러나, 메타고 유전학은 샘플의 오염, DNA 추출 방법의 가변성 및 표준화 된 프로토콜의 부족과 같은 몇 가지 도전에 직면한다. 이러한 문제는 결과의 재현성에 영향을 줄 수 있으므로 분야가 지속적으로 방법을 정제하고 데이터 품질을 향상시키기 위해 새로운 기술을 개발하는 이유입니다.

결론

Metagenomics는 연구자들이 이전에는 불가능한 방식으로 전체 미생물 커뮤니티를 분석 할 수있게함으로써 많은 분야에서 새로운 가능성을 열었습니다. 인간 건강에서 환경 지속 가능성에 이르기까지, 메타 게놈의 적용은 광대하고 성장하고 있습니다. 그러나 잠재력을 극대화하려면보다 표준화 된 방법론과 개선 된 계산 도구가 필요합니다. 이러한 과제가 해결됨에 따라, Metagenomics는 미생물 세계에 대한 우리의 이해와 지구에 미치는 영향을 발전시키는 데 계속 중요한 역할을 할 것입니다.



NotebookLM

다음은 메타게노믹스 논문을 바탕으로 일반 시민들이 이해하기 쉽도록 메타게노믹스의 배경, 목적, 방법, 결과 및 고려 사항을 설명하는 블로그 게시물입니다.

### 메타게노믹스: 보이지 않는 세계를 밝히다

우리의 세상은 **미생물**로 가득 차 있습니다. 우리 몸 안팎은 물론이고, 흙, 물, 공기, 심지어 우리가 먹는 음식에도 존재합니다. 이 미생물들은 **생태계**에서 중요한 역할을 하며, 우리 건강과 환경에 큰 영향을 미칩니다.

**메타게노믹스**는 이러한 **미생물 군집의 유전 물질을 직접 분석**하여 그들의 세계를 이해하려는 연구 분야입니다. 마치 현미경으로 숲 전체를 들여다보는 것과 같습니다.

#### 왜 메타게노믹스를 연구해야 할까요?

*   **미생물 다양성 탐구**: 메타게노믹스는 **배양**이 어려운 미생물을 포함하여 모든 미생물을 분석할 수 있습니다. 이를 통해 **미생물 생태계**의 전체적인 모습을 파악하고, **새로운 미생물**을 발견할 수 있습니다.

*   **인간 건강**: 우리 몸에 사는 미생물은 **소화, 면역, 질병** 등 다양한 부분에 영향을 미칩니다. 메타게노믹스 연구는 **질병과 미생물** 사이의 연관성을 밝히고, **개인 맞춤형 치료**법 개발에 기여할 수 있습니다.

*   **환경 보존**: **토양, 물** 속 미생물은 **영양소 순환, 오염 물질 분해** 등 중요한 역할을 합니다. 메타게노믹스는 **미생물 군집**을 분석하여 **환경 오염**을 줄이고, **생태계**를 보존하는 데 도움을 줄 수 있습니다.

*   **지속 가능한 농업**: **토양 미생물**은 **작물 생산성**을 높이고 **질병 저항성**을 향상시키는 데 기여합니다. 메타게노믹스는 **유익한 미생물**을 식별하고, **친환경적인 농업 방식**을 개발하는 데 활용될 수 있습니다.

#### 메타게노믹스, 어떻게 연구하나요?

메타게노믹스 연구는 다음과 같은 단계로 진행됩니다:

1.  **샘플 채취**: 연구하고자 하는 환경(예: 토양, 물, 인체)에서 샘플을 채취합니다.

2.  **DNA 추출**: 샘플에서 모든 미생물의 **DNA**를 추출합니다.

3.  **DNA 염기서열 분석 (시퀀싱)**: 추출한 **DNA**를 잘게 자른 후, **DNA** 염기서열을 분석합니다. **차세대 시퀀싱(NGS)** 기술 덕분에 빠르고 저렴하게 분석할 수 있게 되었습니다.

4.  **생물정보학 분석**: **컴퓨터**를 이용하여 **DNA** 데이터를 분석합니다. **미생물** 종류를 파악하고, 어떤 기능을 하는지 예측합니다.

    *   **데이터 품질 관리**: 시퀀싱 과정에서 발생한 오류나 오염된 데이터를 제거합니다.

    *   **유전체 조립**: 짧은 **DNA** 조각들을 연결하여 **미생물 유전체**를 재구성합니다.

    *   **유전자 예측**: **DNA** 서열에서 **유전자**를 찾아냅니다.

    *   **기능 주석 달기**: **유전자**가 어떤 기능을 하는지 데이터베이스와 비교하여 주석을 달아줍니다.

    *   **분류학적 특성 분석**: **미생물 군집**의 구성과 비율을 파악합니다.

#### 메타게노믹스 연구 결과, 무엇을 알 수 있을까요?

메타게노믹스 연구를 통해 다음과 같은 것들을 알 수 있습니다:

*   **미생물 군집** 구성 및 다양성

*   **미생물**의 기능 및 대사 경로

*   **항생제 내성 유전자** 및 **병원성 인자**

*   **미생물** 간의 상호 작용

*   **질병**과의 연관성

*   **새로운 유전자** 및 기능 발견

#### 메타게노믹스 연구, 아직 개선할 점이 있나요?

메타게노믹스는 엄청난 잠재력을 가진 분야이지만, 해결해야 할 과제도 남아있습니다:

*   **표준화된 프로토콜 부족**: 샘플 채취, **DNA** 추출, 데이터 분석 방법이 연구마다 달라 결과 비교가 어렵습니다.

*   **데이터베이스 편향**: 알려진 미생물 정보가 부족하여 분석 결과가 정확하지 않을 수 있습니다.

*   **오염**: 낮은 농도의 샘플은 오염에 취약하여 결과 해석에 어려움을 겪을 수 있습니다.

*   **계산 능력**: 방대한 데이터를 처리하려면 고성능 컴퓨터가 필요합니다.

이러한 문제점을 해결하기 위해 많은 과학자들이 노력하고 있습니다. **표준 프로토콜**을 개발하고, **데이터베이스**를 개선하며, **새로운 분석 방법**을 개발하는 등 다양한 시도가 이루어지고 있습니다.

#### 미래의 메타게노믹스

메타게노믹스는 **공중 보건, 환경 관리, 생물 다양성 보존** 등 다양한 분야에서 혁신을 가져올 수 있습니다.

*   **감염병 진단 및 감시**: 메타게노믹스는 **새로운 병원체**를 발견하고, **항생제 내성** 확산을 감시하는 데 활용될 수 있습니다.

*   **맞춤형 의료**: **개인**의 **미생물** 정보를 분석하여 **질병**을 예측하고, **맞춤형 치료**법을 제공할 수 있습니다.

*   **환경 오염 해결**: **오염 물질**을 분해하는 **미생물**을 찾아 **환경**을 정화하는 데 활용할 수 있습니다.

*   **생물 공학**: **새로운 효소**와 **물질**을 발견하여 **생물 공학** 발전에 기여할 수 있습니다.

**결론적으로 메타게노믹스는 우리 눈에 보이지 않는 미생물의 세계를 밝혀 인간의 건강과 환경을 개선하는 데 기여할 수 있는 매력적인 분야입니다. 앞으로 메타게노믹스 연구가 더욱 발전하여 더 나은 미래를 만드는 데 도움이 되기를 기대합니다.**



deepseek

### 메타지노믹스(Metagenomics): 미생물의 숨겨진 세계를 탐구하다

#### 배경과 목적

우리 주변에는 눈에 보이지 않는 수많은 미생물들이 존재합니다. 이 미생물들은 토양, 물, 공기, 심지어 우리 몸 속에서도 다양한 역할을 하며 생태계와 인간 건강에 중요한 영향을 미칩니다. 메타지노믹스는 이러한 미생물 군집의 유전적 다양성과 기능을 연구하는 학문으로, 최근 몇 년 동안 큰 발전을 이루었습니다. 특히, 차세대 시퀀싱 기술(NGS)의 등장으로 미생물 군집의 유전체를 빠르고 정확하게 분석할 수 있게 되었습니다.

이 논문은 메타지노믹스 연구의 핵심 개념과 방법론을 소개하며, 미생물 군집을 이해하고 이를 활용하는 데 있어서의 현재의 도전과제와 미래의 가능성을 탐구합니다. 이를 통해 인간 건강, 농업, 환경 모니터링 등 다양한 분야에서 메타지노믹스가 어떻게 활용될 수 있는지 살펴봅니다.

#### 메타지노믹스 연구 방법

메타지노믹스 연구는 크게 샘플 수집, DNA 추출, 시퀀싱, 데이터 분석의 단계로 나뉩니다.

1. **샘플 수집**: 연구 목적에 따라 토양, 물, 혈액, 대변 등 다양한 환경에서 샘플을 수집합니다. 이때, 샘플의 대표성과 오염 방지를 위해 신중하게 진행됩니다.

2. **DNA 추출**: 샘플에서 미생물의 DNA를 추출합니다. 이 과정에서 사용하는 방법에 따라 결과가 달라질 수 있으므로, 표준화된 프로토콜을 따르는 것이 중요합니다.

3. **시퀀싱**: 추출한 DNA를 시퀀싱하여 미생물의 유전 정보를 읽어냅니다. 최신 기술인 차세대 시퀀싱(NGS)은 짧은 시간에 대량의 데이터를 생성할 수 있어 메타지노믹스 연구의 핵심 도구로 자리 잡았습니다.

4. **데이터 분석**: 시퀀싱 데이터를 분석하여 미생물 군집의 구성과 기능을 파악합니다. 이를 위해 다양한 생정보학(Bioinformatics) 도구와 데이터베이스가 활용됩니다.

#### 연구 결과

메타지노믹스 연구를 통해 다양한 환경에서의 미생물 군집의 다양성과 기능을 밝혀낼 수 있었습니다. 예를 들어, 인간의 장내 미생물 군집은 소화, 면역, 대사 등 다양한 생리적 과정에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났습니다. 또한, 토양과 물 속의 미생물은 영양소 순환과 오염 물질 분해에 기여하며, 환경 건강을 유지하는 데 중요한 역할을 합니다.

#### 고찰과 미래 전망

메타지노믹스 연구는 여전히 많은 도전과제를 안고 있습니다. 샘플 처리와 데이터 분석의 표준화, 데이터베이스의 완성도, 계산 자원의 한계 등이 주요 문제로 꼽힙니다. 그러나 이러한 도전을 극복하기 위해 더욱 강력한 계산 프레임워크와 학제간 협력이 필요합니다.

미래에는 메타지노믹스가 임상 진단, 항생제 내성 모니터링, 환경 보호 등 다양한 분야에서 더욱 활발히 활용될 것으로 기대됩니다. 특히, 개인 맞춤형 의학과 지속 가능한 농업에 기여할 수 있는 잠재력이 큽니다.

#### 결론

메타지노믹스는 미생물 군집의 복잡성을 이해하고 이를 활용하는 데 있어 혁신적인 도구입니다. 이 논문은 메타지노믹스 연구의 현재와 미래를 조명하며, 미생물의 세계를 탐구하는 데 있어서의 중요성을 강조합니다. 앞으로의 연구와 기술 발전이 어떻게 우리의 삶과 환경에 긍정적인 영향을 미칠지 기대해 봅니다.



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### 메타게놈학(Metagenomics)이란 무엇일까요? 일반인을 위한 쉬운 설명

안녕하세요, 여러분! 오늘은 최근 과학계에서 주목받고 있는 **메타게놈학(Metagenomics)**에 대해 이야기해보려고 합니다. 조금 생소한 단어일 수 있지만, 사실 우리 일상과 건강, 환경에 깊이 연관된 아주 흥미로운 주제예요. 제가 업로드한 논문(*Nature Reviews Methods Primers*, 2025)을 바탕으로, 이 논문이 왜 만들어졌고, 어떤 목적을 가지고 있으며, 어떤 방법으로 연구했는지, 그리고 그 결과와 의미를 최대한 쉽게 풀어서 설명해볼게요. 자, 함께 시작해봅시다!

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#### 1. 논문이 나온 배경: 미생물 세계의 비밀을 풀고 싶어서!

우리의 주변에는 눈에 보이지 않는 수많은 미생물들이 살아가고 있어요. 이 미생물들은 흙, 물, 공기, 그리고 우리 몸 안에도 존재하면서 환경과 건강에 큰 영향을 미칩니다. 예를 들어, 장 속 미생물은 소화를 돕고 면역력을 키워주죠. 하지만 이런 미생물들은 종류가 너무 다양하고 복잡해서, 과거에는 한 번에 몇 개만 연구할 수 있었어요.

그러다가 **메타게놈학**이라는 기술이 등장하면서, 과학자들이 "한꺼번에 모든 미생물을 분석해보자!"라는 꿈을 꾸게 됐어요. 메타게놈학은 미생물을 하나하나 키워서 연구하는 대신, 환경이나 몸속 샘플에서 DNA를 뽑아내 그 안의 모든 미생물 정보를 읽어내는 방법이에요. 이 기술은 특히 **차세대 시퀀싱(NGS)**이라는 빠르고 저렴한 DNA 분석법 덕분에 엄청 발전했죠.

이 논문은 이런 메타게놈학의 최신 기술과 방법을 정리하고, 아직 풀리지 않은 문제를 해결하려고 작성됐어요. 연구자들이 더 정확하고 유용한 결과를 얻을 수 있도록 도와주는 가이드북 같은 느낌이랍니다.

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#### 2. 논문의 목적: 더 나은 연구를 위한 길잡이

이 논문의 목표는 간단해요. 메타게놈학을 활용해 미생물 세계를 더 잘 이해하고, 그 지식을 건강, 농업, 환경 보호 같은 실생활에 적용하려는 거예요. 하지만 문제는, 메타게놈학 연구가 쉽지 않다는 점이에요. 샘플을 어떻게 채취하고, DNA를 어떻게 뽑아내고, 데이터를 어떻게 분석하느냐에 따라 결과가 달라질 수 있거든요.

그래서 이 논문은:

- 샘플 채취부터 분석까지의 **최신 방법**을 소개하고,

- 연구 과정에서 생기는 **문제점**(예: 오염, 표준 부족 등)을 짚어보며,

- 더 나은 결과를 얻기 위한 **해결책**을 제안하려고 했어요.

쉽게 말해, "메타게놈학을 더 잘하려면 이렇게 해보세요!"라는 친절한 안내서인 셈이죠.

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#### 3. 연구 방법: 미생물 DNA를 캐내는 여정

이 논문은 실제 실험 과정을 단계별로 설명해요. 일반인이 이해하기 쉽게 풀어보면, 메타게놈학 연구는こんな感じ(이런 느낌)입니다:

1. **샘플 채취**: 흙, 물, 대변, 피부 등에서 미생물이 있는 샘플을 모아요. 예를 들어, 장 건강을 연구하려면 대변을, 바다 미생물을 알아보려면 바닷물을 채취하죠. 이때 중요한 건 샘플이 깨끗하고 오염되지 않도록 하는 거예요.

2. **DNA 추출**: 모은 샘플에서 미생물의 DNA를 뽑아내요. 이건 마치 과일을 믹서에 갈아서 즙을 짜내는 것과 비슷해요. 단단한 세균을 깨뜨리려면 기계로 흔들거나(비드 비팅), 효소를 써서 부드럽게 녹이기도 해요.

3. **시퀀싱(Sequencing)**: DNA를 작은 조각으로 나눠서 차세대 시퀀싱 기계로 읽어요. 이 기계는 DNA의 "글자"(A, T, G, C)를 빠르게 해독해주죠. 이 과정은 퍼즐 조각을 모으는 것과 비슷해요.

4. **데이터 분석**: 컴퓨터로 퍼즐 조각을 맞춰서 어떤 미생물이 있고, 그 미생물이 무슨 역할을 하는지 알아내요. 이건 진짜 머리 아픈 작업인데, 요즘은 인공지능(AI)이 도와주기도 한답니다.

이 과정에서 연구자들은 샘플이 오염되지 않게 조심하고, 결과를 정확히 확인하려고 "컨트롤 샘플"(비교용 샘플)을 같이 분석해요.

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#### 4. 결과: 우리가 얻은 것과 한계

논문에서는 메타게놈학이 엄청난 성과를 내고 있다고 말해요. 몇 가지 예를 들어보면:

- **건강**: 장 속 미생물이 염증성 장 질환이나 암과 어떻게 연관 있는지 알아냈어요.

- **농업**: 토양 미생물을 분석해 농작물이 잘 자라게 도와주는 방법을 찾았죠.

- **환경**: 오염된 강이나 공기의 미생물을 조사해 환경을 개선하는 단서를 얻었어요.

하지만 한계도 있어요:

- **오염 문제**: 샘플에 다른 DNA가 섞이면 결과가 엉망이 될 수 있어요.

- **표준 부족**: 연구마다 방법이 달라서 결과를 비교하기 어려워요.

- **복잡한 데이터**: 분석할 데이터가 너무 많아서 컴퓨터가 힘들어할 때도 있죠.

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#### 5. 고찰: 앞으로 나아갈 길

연구자들은 이런 문제를 해결하려면 **표준화된 방법**을 만들고, 더 똑똑한 **컴퓨터 프로그램**을 개발해야 한다고 제안했어요. 또, 의사, 농부, 환경 전문가 같은 다양한 분야의 사람들이 함께 협력하면 메타게놈학이 실생활에 더 큰 도움을 줄 거라고 믿고 있어요.


예를 들어, 병원에서 메타게놈학으로 환자의 미생물을 분석해서 맞춤 치료를 할 수도 있고, 농부가 토양 미생물을 체크해서 비료를 덜 쓰고도 좋은 작물을 키울 수 있을 거예요. 환경을 보호하려는 사람들은 오염된 지역의 미생물을 조사해 복구 방법을 찾을 수도 있고요.

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#### 마무리: 메타게놈학과 우리의 미래

메타게놈학은 우리 주변의 보이지 않는 미생물 세계를 들여다보는 창이에요. 이 논문은 그 창을 더 맑고 크게 만들기 위한 노력의 결과물이고요. 앞으로 이 기술이 발전하면 건강하고 깨끗한 지구를 만드는 데 큰 힘이 될 거예요. 여러분도 이 작은 미생물들이 우리 삶에 얼마나 중요한지 한 번 생각해보세요. 신기하지 않나요?

궁금한 점이 있으면 언제든 물어보세요! 다음에 또 재미있는 과학 이야기로 찾아올게요~ 😊






출처: @ye._.vely618


월요일, 6월 17, 2024

2024년, NGS와 찰떡 궁합인 PCR enzyme는?

 오늘은 NGS 중에서 Amplification NGS에 사용되는 PCR 효소에 대한 내용을 들고 와봤습니다. 이름도 Identifying the best PCR enzyme for library amplification in NGS!! 입니다.

DOI : 10.1099/mgen.0.001228

이미 이전 2011년도에 유사한 작업을 했었고 그때에는 로슈사의 Kapa HiFi가 일루미나에서 라이브러리 증폭 단계에서 최고의 효소임을 확인하였다고 하네요. 그럼 10여년이 지난 2024년도에는 어떤 회사의 polymerase가 압도적 성능을 보여주는지 확인해 보시죠!!


gemini

**제목:** NGS 라이브러리 준비를 위한 최적의 PCR 효소 선택: 2024년 업데이트

**본문:**

NGS는 유전자 검사 및 유전체학 연구에 널리 사용되는 강력한 기술입니다. NGS 라이브러리 준비는 정확하고 효율적인 시퀀싱을 위해 필수적인 단계입니다. 이 단계에서 사용되는 PCR 효소는 결과의 질에 큰 영향을 미칠 수 있습니다.

다양한 PCR 효소가 NGS 라이브러리 준비에 사용할 수 있으며 각 효소마다 고유한 장단점이 있습니다. 연구 목적에 적합한 효소를 선택하는 것이 중요합니다.

최근 연구에서 Quantabio RepliQa Hifi Toughmix, Watchmaker Library Amplification Hot Start Master Mix (2X) ‘Equinox’ 및 Takara Ex Premier가 NGS 라이브러리 준비와 긴 판독 시퀀싱 전의 긴 조각 증폭 모두에 대해 일관된 성능을 제공하는 것으로 나타났습니다.

이 블로그 게시물에서는 NGS에 사용할 최적의 PCR 효소 선택 방법에 대한 지침을 제공합니다. 또한 NGS 라이브러리 준비 및 PCR 효소 선택에 대한 자세한 정보를 제공하는 추가 리소스에 대한 링크를 포함합니다.

**추가 리소스:**

* [NGS 라이브러리 준비를 위한 최적의 PCR 효소 선택]

* [NGS 라이브러리 준비를 위한 PCR 효소 비교]

**결론:**

NGS 라이브러리 준비를 위한 최적의 PCR 효소는 연구 목적, 사용하는 템플릿 및 이용 가능한 예산에 따라 다릅니다. 새로운 효소를 선택하기 전에 다양한 효소를 테스트하는 것이 좋습니다.


chatGPT

### NGS에 사용되는 PCR 효소 성능 비교

차세대 시퀀싱(NGS)은 생물학적 연구와 임상 진단에서 필수적인 도구로 자리 잡았습니다. 그러나 NGS의 성공은 다양한 단계에서 발생할 수 있는 편차를 최소화하는 데 달려 있습니다. 그 중에서도 PCR(중합효소 연쇄 반응) 단계는 편차를 유발할 수 있는 주요 단계입니다. 이번 글에서는 NGS에 사용되는 PCR 효소의 성능을 비교하고, 최근 연구 결과를 통해 어떤 효소들이 가장 좋은 성능을 보이는지 살펴보겠습니다.

#### PCR과 NGS의 관계

NGS를 수행하기 위해서는 DNA를 작은 조각으로 분해하여 시퀀싱 라이브러리를 준비해야 합니다. 이 과정에서 PCR은 중요한 역할을 합니다. PCR을 통해 라이브러리 조각들을 증폭시켜 시퀀싱에 필요한 충분한 양의 DNA를 확보할 수 있습니다. 그러나 모든 PCR 효소가 동일한 성능을 발휘하는 것은 아니며, 특히 GC 함량이 높거나 낮은 DNA 조각에서 차이가 두드러집니다.

#### 최근 연구: 최상의 PCR 효소 비교

최근 Wellcome Sanger Institute와 Cambridge 대학의 연구진이 다양한 PCR 효소를 비교하는 연구를 수행하였습니다. 이 연구에서는 다음과 같은 효소들이 특히 뛰어난 성능을 보였습니다:

1. **Quantabio RepliQa Hifi Toughmix**

2. **Watchmaker Library Amplification Hot Start Master Mix (2X) 'Equinox'**

3. **Takara Ex Premier**

#### 성능 평가 기준

이 연구에서는 효소들의 성능을 다음과 같은 기준으로 평가했습니다:

- **수율**: 증폭된 DNA의 양

- **유전체 커버리지 균일성**: 유전체 전체에서 균일하게 시퀀싱되는 정도

- **SNP 및 Indel 정확도**: 시퀀싱 데이터에서 단일 뉴클레오타이드 변이(SNP)와 삽입/삭제 변이(Indel)를 정확하게 탐지하는 능력

#### 연구 결과

**Quantabio RepliQa Hifi Toughmix**는 모든 유전체에서 일관된 성능을 보여주며, 낮은 커버리지 편차(LCI)와 높은 정확도를 자랑합니다. 특히 다양한 GC 함량을 가진 유전체에서 우수한 커버리지 균일성을 보였습니다.

**Watchmaker Library Amplification Hot Start Master Mix (2X) 'Equinox'**와 **Takara Ex Premier** 역시 높은 성능을 보이며, 특히 PCR-free 데이터셋과 유사한 결과를 제공합니다. 이는 이 효소들이 GC 함량이 극단적인 유전체에서도 편차 없이 증폭할 수 있음을 의미합니다.

#### 결론

PCR은 NGS 라이브러리 준비 과정에서 중요한 단계이며, 효소 선택은 시퀀싱 데이터의 품질에 큰 영향을 미칩니다. 최근 연구에 따르면 Quantabio RepliQa Hifi Toughmix, Watchmaker Library Amplification Hot Start Master Mix (2X) 'Equinox', 그리고 Takara Ex Premier가 NGS에 가장 적합한 효소로 확인되었습니다. 이들 효소를 통해 연구자들은 보다 정확하고 일관된 NGS 데이터를 얻을 수 있을 것입니다.

NGS를 준비하는 연구자들에게 이 정보가 도움이 되기를 바라며, 각자의 연구 목적에 맞는 최적의 PCR 효소를 선택하여 성공적인 결과를 얻으시길 바랍니다.

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이 블로그 글이 NGS와 관련된 연구자들에게 유익한 정보를 제공하고, 보다 나은 연구 결과를 얻는 데 기여할 수 있기를 바랍니다.


clova-x

NGS에 사용되는 PCR 효소의 성능 비교와 관련된 내용은 다음과 같습니다.

1. **PCR 증폭의 바이어스를 최소화하는 효소 선택이 중요합니다.**

NGS 라이브러리 준비 및 시퀀싱 과정에서 PCR이 가장 큰 바이어스를 도입합니다. PCR 증폭은 여러 주기에서 증폭되며, 이 과정에서 특정 DNA 조각이 선택적으로 증폭될 수 있습니다. 이를 방지하기 위해 바이어스를 최소화하는 효소를 선택하는 것이 중요합니다.

2. **Kapa HiFi는 가장 적은 편향과 가장 좋은 재현율을 보여줍니다.**

Kapa HiFi는 다양한 표적을 효율적으로 증폭시킬 수 있으며, 바이어스를 최소화하여 정확하고 재현성 있는 NGS 데이터를 생성할 수 있습니다.

3. **상업적으로 이용 가능한 PCR 효소가 많습니다.**

현재는 다양한 PCR 효소가 NGS와 잘 작동하며, 상업적으로 이용 가능한 PCR 효소가 많습니다. 사용자는 효소를 선택할 때 주의해야 합니다.

4. **균일성을 고려하면 RepliQa, Watchmaker Equinox, Takara Ex Premier 등의 효소가 적합합니다.**

균일성을 고려하면 RepliQa, Watchmaker Equinox, Takara Ex Premier 등의 효소가 적합합니다. 이러한 효소는 PCR 프리 라이브러리 데이터와 유사한 범위의 균일성을 제공합니다.

5. **효소 선택은 매우 중요합니다.**

효소 선택은 매우 중요합니다. 실험 조건과 목적에 따라 적절한 효소를 선택해야 합니다. 효소의 성능은 시간이 지남에 따라 변화할 수 있으므로, 최신 연구 결과를 참고하여 효소를 선택하는 것이 좋습니다.

위의 내용을 바탕으로, NGS에 사용되는 PCR 효소의 성능 비교와 관련된 블로그 글을 작성할 수 있습니다. 글에서는 각 효소의 특징과 장단점을 소개하고, 실험 조건과 목적에 따라 적절한 효소를 선택하는 방법을 제시하는 것이 좋습니다. 또한, NGS 기술의 발전에 따라 새로운 효소가 등장할 수 있으므로, 최신 연구 결과를 참고하여 글을 업데이트하는 것이 중요합니다.


claude.ai

제목: NGS 라이브러리 준비에 최적화된 PCR 효소 비교 - 새로운 효소들의 약진

NGS (Next-Generation Sequencing) 기술이 발전하면서 라이브러리 준비 과정에서 PCR 증폭 단계의 중요성이 더욱 부각되고 있습니다. PCR 효소의 선택이 데이터의 질과 분석 결과에 큰 영향을 미치기 때문인데요, 최근 Quail 등의 연구진이 발표한 논문에서 이에 대한 흥미로운 결과를 확인할 수 있었습니다.

연구진은 20여 종의 상용 고충실도 PCR 효소와 NGS 증폭용 믹스를 다양한 GC 함량과 조성을 가진 Illumina 라이브러리 템플릿에서 테스트했습니다. 놀랍게도 상용 효소들 간에 수율과 게놈 커버리지 균일성에서 상당한 차이를 보였는데요, 특히 Quantabio RepliQa HiFi ToughMix, Watchmaker Library Amplification Hot Start Master Mix (2X) 'Equinox', Takara Ex Premier 세 가지 효소가 모든 테스트 게놈에 걸쳐 일관되게 우수한 성능을 보였습니다. 이들은 PCR-free 데이터와 매우 유사한 균일한 커버리지를 나타냈죠.

흥미롭게도 기존에 가장 널리 사용되던 Kapa HiFi 효소는 이번 테스트에서 위 세 효소에 비해 다소 뒤쳐지는 모습을 보였습니다. 이는 NGS 기술과 함께 PCR 효소들도 계속해서 발전하고 있음을 시사하는 결과인데요, 연구자들에게 선택의 폭이 더 넓어졌다는 점에서 긍정적으로 받아들여지고 있습니다.

특히 Quantabio RepliQa HiFi ToughMix는 short-read 라이브러리 증폭 뿐만 아니라 long-read sequencing을 위한 긴 프래그먼트 증폭에서도 가장 우수한 성능을 보여, 다양한 NGS 적용 분야에서 두각을 나타냈습니다.

이번 연구 결과는 NGS 분야의 발전상을 보여주는 동시에, 데이터의 질을 높이기 위한 실험 단계에서의 중요한 고려사항을 환기시킵니다. 앞으로도 새로운 효소들의 개발과 평가를 통해 NGS 기술이 더욱 정교해지고, 연구자들이 보다 최적화된 실험 설계를 할 수 있게 되기를 기대해 봅니다.


이것저것 테스트해본 결과 

- Quantabio RepliQa Hifi Toughmix
- Watchmaker Library Amplification Hot Start Master Mix (2X) 'Equinox'
- Takara Ex Premier

이 세개 PCR enzyme가 10년전 최고의 PCR 효소의 대를 잇게 되었습니다.

그리고 이번에는 10년 전과 달리 숏외에 Long read 플랫폼에서도 테스트를 진행하였다고 합니다.  숏/Long을 포함해서 이런저런 테스트를 다 해보니 위에 3개 중에서도 Quantabio RepliQa Hifi Toughmix가 보고서 작성 시점에 가장 좋은 결과를 보여주는 enzyme라고 합니다.

실험자들에게 가치있는 benchmark article이 나온듯 하네요.

그러나 benchmark 레포트에서 좋다고 침이 마르도록 떠들어봤자. 나와 안맞으면 도루묵이라는... 

그럼 모두들 즐거운 실험하시기 바랍니다. :)


출처: @ye._.vely618


목요일, 5월 16, 2024

식단과 신체활동이 진짜 메틸레이션에 변화에 효과가 있을까

오늘은 메틸레이션에 관련된 내용을 한번 들고와봤습니다. 제목은 Impact of a diet and activity health promotion intervention on regional patterns of DNA methylation 으로 2019년에 출판된 논문입니다.

DOI: 10.1186/s13148-019-0707-0 입니다.

일루미나의 EPIC 850K 어레이를 이용해서 DNA 메틸화 수준을 확인하였고, Make Better Choices 2 라는 프로그램에 등록된 340명의 사람들 대상으로 식단과 신체활동 전후에 따라 differentially methylated regions (DMR) 즉 메틸화 차이가 보이는 영역들을 확인했다고 합니다.

이 DMR에는 세포주기 조절, 발암 관련된 유전자들이 포함되어있었다고하니!!! 먹는것도 중요한듯합니다

오늘은 clova-x, claude와 chatGPT-3.5에 "파일 내용을 바탕으로 블로그에 게시할 내용의 글을 A4 2장 분량으로 작성해주세요" 라고 요청했습니다. :)


clova-x

이 연구는 건강한 식단과 신체 활동이 DNA methylation에 미치는 영향을 조사했다.

건강한 식단과 신체 활동은 만성 질환의 위험을 감소시키며, DNA methylation과 같은 유전적 메커니즘이 질병의 위험에 영향을 미친다. 신체 활동 중재는 생리적 효과를 포함하며, reduced DNA methylation은 inflammation, oxidative stress, immune function에 영향을 준다.

MBC2 연구는 combined physical activity와 dietary intervention의 영향을 조사한 첫 번째 연구이다. MBC2 다이어트와 신체 활동 중재는 세포 주기 조절과 암 발생에 관련된 유전자 영역의 DNA 메틸레이션 패턴에 영향을 미쳤다. DNA 메틸레이션을 바이오마커로 삼아 건강 행동 변화를 계획에 포함시켜 특정 인구가 혜택을 볼 수 있는지를 미래 연구에서 살펴볼 것이다.

이 연구는 DNA methylation에 대한 선행 연구를 바탕으로 신체 활동과 식이 요소를 포함하고 혈액 샘플에서 methylation을 측정했다. DNA methylation은 유전자 발현을 조절하는 중요한 역할을 하며, 암, 당뇨병, 심혈관 질환 등 다양한 질병과 관련이 있다.

DNA methylation은 세포 분화, 노화, 환경 요인 등 다양한 요인에 의해 영향을 받는다. 이 연구는 건강한 생활습관이 DNA methylation에 미치는 영향을 조사함으로써, 건강한 삶을 유지하기 위한 중요한 정보를 제공한다.

이 연구는 DNA methylation에 대한 이해를 높이고, 건강한 삶을 유지하기 위한 방법을 제시하는 데 큰 도움이 될 것이다. 앞으로 이 연구를 바탕으로 더 많은 연구가 진행되어, 건강한 삶을 위한 더 많은 정보가 제공될 것으로 기대된다.

건강한 삶을 유지하기 위해서는 건강한 식단과 신체 활동이 중요하다. 이 연구는 건강한 삶을 유지하기 위한 방법을 제시하는 데 큰 도움이 될 것이다. 우리는 이 연구를 바탕으로 건강한 삶을 위한 노력을 계속해야 한다.


claude

안녕하세요 독자 여러분,

오늘은 최근 연구 결과를 바탕으로 건강한 생활습관이 우리 몸의 DNA 메틸화에 미치는 영향에 대해 알아보겠습니다. DNA 메틸화는 유전자 발현을 조절하는 주요 후성유전적 메커니즘으로, 우리 몸의 다양한 기능과 질병 위험에 영향을 줄 수 있습니다.

Northwestern 대학의 연구팀은 '더 나은 선택하기 2(Make Better Choices 2, MBC2)' 프로그램에 참여한 성인 68명을 대상으로 식단과 신체활동 개선이 전체 게놈의 DNA 메틸화 패턴에 미치는 영향을 조사했습니다. 이 9개월 무작위 대조 시험에서 연구 참가자들은 과일/야채 섭취 증가, 포화 지방 섭취 감소, 신체활동 증가, 좌식행동 감소 등의 생활습관 개선에 참여했습니다.

연구팀은 Illumina EPIC 850k 배열칩을 사용하여 기저 시점, 3개월 시점, 9개월 시점에서 전체 게놈 메틸화 수준을 측정했습니다. 그 결과 대조군과 중재군 간에 154개(3개월)와 298개(9개월)의 차등적으로 메틸화된 유전체 영역(DMR)이 발견되었습니다.

특히 IRF2, DUSP5P1 등 면역 반응, 종양 억제, 노화 관련 유전자의 메틸화 변화가 관찰되었습니다. 경로 분석에서는 세포부착, PI3K/AKT, Wnt/베타-캐터닌, sonic hedgehog 등 세포 기능과 발암 관련 경로의 메틸화 변화가 확인되었습니다.

이 연구 결과는 건강한 식단과 운동 습관이 DNA 메틸화를 통해 면역, 대사, 발암 등 다양한 생물학적 메커니즘에 영향을 미칠 수 있음을 보여줍니다. 이는 만성 질환 예방을 위한 정밀 의학적 접근에서 DNA 메틸화가 중요한 생체지표로 활용될 수 있음을 시사합니다.

하지만 이 연구는 비교적 작은 샘플 크기를 가지고 있어 일반화에 제한이 있습니다. 또한 백인과 아프리카계 미국인만을 대상으로 했기 때문에 인종별 차이를 고려하지 못했습니다. 추가 연구를 통해 더 큰 샘플과 다양한 인구 집단에서 유사한 결과가 재현되는지 확인할 필요가 있겠습니다.

DNA 메틸화에는 식단과 운동 외에도 나이, 환경오염, 스트레스, 질병 등 다양한 요인들이 영향을 미칩니다. 따라서 건강한 생활 습관과 함께 전반적인 생활 환경 개선을 통해 DNA 메틸화를 포함한 에피지놈을 긍정적으로 조절할 수 있을 것입니다.

오늘 소개한 연구 결과는 우리가 얼마나 건강한 삶을 영위하는지에 따라 DNA 메틸화를 통해 유전자 발현과 질병 위험이 변화할 수 있음을 보여줍니다. 앞으로 건강한 식단과 운동 습관을 실천하고, 전반적인 생활 환경을 개선하는 것이 만성 질환 예방을 위해 중요할 것입니다. 여러분 모두 건강한 하루 되시기 바랍니다.


chatGTP 3.5

타이 치 연습과 DNA 메틸화: 건강에 미치는 영향

최근 연구에 따르면, 우리의 식습관과 생활 방식은 우리의 유전자를 조절하는데 영향을 줄 수 있다고 합니다. 특히, 타이 치와 같은 신체 활동이 DNA 메틸화라는 생물학적 메커니즘을 통해 우리의 유전자 발현에 영향을 줄 수 있다는 것이 최근 연구 결과입니다.

chatGPT는 그만 알아봅니다. Orz


clova-x와 claude는 논문파일을 직접 업로드하였기에 내용을 정확하게 이해하였는데 chatGPT같은 경우 파일업로드 대신 url을 제공하여서 제대로 내용을 인지 못한 것으로 생각됩니다.

claude는 역시 믿고 쓰면 되겠습니다.



출처: @ye._.vely618


금요일, 12월 01, 2023

이제 우리 cfDNA를 활용해 보아요 (feat. 머신러닝)


Genome-wide cell-free DNA fragmentation in patients with cancer


"내 혈관 속 DNA가 말해줘"라는 BTS의 DNA의 가사 처럼 우리 혈관 속에는 우리 상태를 알게 해주는 마커로 사용할 수 있는 cfDNA가 있습죠

오늘은 2019년 발표된 "Genome-wide cell-free DNA fragmentation in patients with cancer"라는 논문을 가져와봤습니다.

DOI: 10.1038/s41586-019-1272-6

이 논문은 암환자의 혈액 내 cfDNA를 측정하여 암 진단은 당연하고, 어떤 암종인지, 조기 발견 및 모니터링을 위한 초석을 놓은... 물론 그전에 다른 논문에서 이미 초석을 다진 논문도 있을것 같긴하지만, 어찌됐든 모 괜찮은 논문이라고 생각합니다. :)


그래서 7종의 암환자 200여명과 건강한 (aka 암환자가 아닌) 건강한 사람의 cfDNA을 분석해서 이리저리 굴려보고 돌려보고 해서(결국 머신러닝 아니겠습니까) 암종간 cfDNA의 profile의 변화를 머신러닝을 통해 모델을 만들었고, cfDNA profile 모델과 함께 cfDNA상에 존재하는 변이를 활용하면 더 나은 결과를 보여줬다고 하네요


cfDNA는 원래 혈액속에 있는 암에 걸리면 (무조건은 아니지만) cfDNA의 양이 증가하게 됩니다. 원래 혈액속에 떠다니는 cfDNA가 만들어지는 source외에 암세포가 혈액에 추가로 cfDNA가 더 공급하는 꼴이 되기때문이죠.

cfDNA 중 암세포에서 나온 cfDNA인 ctDNA?만 따로 선별하는 방법으로 접근하기도합니다. 개인적으로는 cfDNA에서 ctDNA를 찾겠다 보다는  cfDNA를 더 잘 characterization 하는게 나을듯한데... cfDNA를 characterization하면 ctDNA를 더 잘 구별할 수 있게 되는건가? 여튼..

아.. 그래서 제가 블로그에 가끔씩 얘기했던 NIPT를 하다가 산모의 암도 찾아냈다고 하는 얘기가 있었기도 했습니다.

오늘은 cfDNA와 머신러닝 방법을 이용해서 암진단 및 암종 구분을 하는 논문에 대해서 잠깐 얘기해보았는데, 분야를 막론하고 머신러닝 모델을 개발할것 까지는 아니지만 활용을 잘 할 수 는 있어야 한다는 느낌은 항상 받는것 같습니다.


23년 12월의 첫날, 아내느님의 탄생일 기념으로 포스팅을 해보았습니다.




출처 : @candyz_hyojung


수요일, 10월 16, 2019

메타지놈은 kaiju와 함께

코펜하겐에 계시는 이름좀 들어본 A. Krogh옹이 속한 팀(저자가 2명인건 비밀)에서 출판한 메타지놈 classification 분석 툴인 kaiju (1저자님이 퍼시픽림좀 보신듯.. 그럼 kaiju이후 analysis pipeline은 jager인건가)에 대해서 잠시 얘기해 보도록 하겠습니다.

웹서버 : http://kaiju.binf.ku.dk/
논문 : Fast and sensitive taxonomic classification for metagenomics with Kaiju
현재 kaiju버전 : https://github.com/bioinformatics-centre/kaiju/releases/tag/v1.7.1


모 이제 metagenome이야 쩔 핫해요라는거는 일주일에 한두번은
수십억 L. 로 시작하는 미생물들을 우리 입안에 털어넣고 있는이상 따로 말해야하는가?

그렇지만 아직도 연구할건 많다는건 비밀이라서
많은 연구자들이 다양한 연구를 하기위해 이것저것 시도를 할 때
사용할 도구들을 계속 만들고 있는데 이 kaiju 또한 그런 도구중 하나 되겠습니다.

모 아이디어는 기존에는 DNA read를 었어서 DNA랑 비교했는데
우리 그러지 말고 단백질 조각이랑 비교하면 어떻겠니? 하는 논문 되겠습니다.

걍 제일 중요한 Figure

결론: DNA-DNA 비교 하지말고 DNA-Protein비교가 더 좋지? 되겠습니다.


그리고 위의 그림으로만 믿지 못하는 (저같은) 닝겐들을 위해서
그럼 너님들을 위해서 real 샘플에서 결과를 보여주지 훗
기대하시라고!

됐냐?

추가적으로 전세계적으로 NGS는 일루미나느님이 잡고 있다보니 저자분들께서
HiSeq(Short)과 MiSeq(Long)에 대해서 kaiju와 kreken으로 비교해두었습니다.
HiSeq에서는 두 프로그램의 sensitivity나 precision은 별로 차이가 없었고 MiSeq결과에서는 그래도 (phylum 수준에서나마) kaiju(그냥도 아니고 greedy-5 모드)가 karken보다 조금더 높은 sensitivity와 precision을 보여준다고 합니다.

결론은 Microbiome은 MiSeq으로 대동단결(진정 MiSeq밖에 없는것인가.. Orz)




출처: @sana_twice.09